rna干扰技术的原理 rna干扰技术大概步骤
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1、您好!(RNA干扰的原理附图有六张,但是这里只能粘贴插入一张图片,你把邮箱给我,我发给你完整的原理图)短断断的双链RNA可以通过激励基因的mRNA降解来高效、特异的搅动体内特异性基因表达,促使细胞表现出特异性基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference,RNAi)。
2、siRNA(small interfering RNAs)就是这种短断双链RNA分子,能够以序列同源互补的mRNA为靶标,降解特异性的mRNA。
3、首先外源导入的dsRNA被切割为19~23nt的小分子干扰RNA(siRNA)。
4、Dicer作为带领RNA酶家族的一个成员,切割dsRNA为19~23nt siRNA,这是一个依赖ATP的消耗能过程。 切割后的siRNA具有3’两个标记TT明显终结。
5、然后siRNA结合到RNA酶复合物上形成RNA诱导的基因沉默复合体(RISC,RNA-induced silencing complex)。
6、该复合体依赖ATP释能而解siRNA双链成单链以激活RISC。
7、激活的RISC通过由siRNA决定的碱基互补原理切割同源序列的基因调控本,最终导致基因沉默效应。
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